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技術文章

Technical articles

2015
10-29

成功完成WB檢測，必須滿足的4個條件
免疫印跡（immunoblotting）又稱蛋白質印跡（Westernblotting），是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由于免疫印跡具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現已成為蛋白分析的一種常規技術。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。結合化學發光檢測，可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達量差異。成功完成WesternBlot檢...
2015
10-26

上海恒遠解說ELISA試劑盒實驗的技術手段和實驗前準備
時光匆匆而過，十月進入尾聲，即將迎來購物狂潮“雙11”，在十月購我司ELISA試劑盒的老師多個選擇我司待測，在實驗中我司技術整理了相關實驗技術，下面我們就來看看：上海恒遠解說ELISA試劑盒實驗的技術手段和實驗前準備！1、其抗原抗體反應具有高度的特異性。2、將酶催化反應的放大作用和抗原抗體親和反應的高度專一性、特異性相結合，以酶標記的抗原或抗體作為主要試劑進行免疫測試，所以具有很高的靈敏度。3、實現了在細胞或亞細胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位，或在微克、甚至納克水平上對其進...
2015
10-22

恒遠技術講解:ELISA空白孔顯現陽性的原因
近日，上海大學金老師實驗后來電向我司咨詢ELISA空白孔為什么顯現陽性？金老師的實驗流程大致是：包被放置一晚4攝氏度12小時-一抗65分鐘-二抗45分鐘-顯色15分鐘“-"表示洗板，洗五次，每次3min。空白孔為不包被，加一抗和二抗，結果空白孔比陽性值還高。通過了解我司技術人員經過詳細分析后給出以下幾種可能：1.手工洗板嗎，臨近空白孔的標準品濃度zui高，有可能甩液體的時候沒注意，標準孔的倒流到空白孔去了哦！2.如果沒有封閉，有可能是未經過封閉的板子對一抗有吸附作用，吸附一抗...
2015
10-21

ELISA加樣時移液槍的正確使用方法
大家經常會討論移液的問題，這個步驟在ELISA實驗中的卻是比較重要的。在加樣品和加顯色液的時候是定量的，產生氣泡可能會對實驗結果影響蠻大的。總之，掌握微量加樣器加樣必須注意的關鍵點是可以幫助您在實驗中避免不必要的麻煩。1.加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產生氣泡。加樣太快，無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區，易導致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產生污染。出現氣泡則反應液界面有差異。2.試劑的加入在國產試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加，除了要注意滴加...
2015
10-14

實驗必知:ELISA試劑盒實驗條件的選擇
在ELISA試劑盒實驗中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:（1）固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據此判明其吸附性能是否良好。（2）包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之...
2015
10-9

實驗新手如何獨立看懂ELISA實驗結果
ELISA測定按其表示測定結果的方式分為定性和定量測定兩大類。定性測定只是對標本中是否含有待測抗原或抗體作出“有”或“無”的結論，分別用“陽性”和“陰性”來表示。可見定性測定通常是用于傳染性病原體的抗原或抗體的測定，以判斷特定病原體感染的存在與否。而定量測定則是對標本中待測抗原的多少進行量值測定，以具體數值表示。定量測定基本上是用于非病原體抗原物質的測定，如激素、細胞因子、腫瘤標志物、小分子藥物等。FP，hCG、細胞因子等的定量測定。ELISA定性測定的“陰性”和“陽性”的判...
2015
9-29

科研試劑使用注意事項
試劑是試驗、研究開發方面*的化學物質。但有些試劑會因操作有誤而引起意想不到的事故。這樣的試劑大體可分為具有引發火災，爆炸的危險性;因裸露而對人體產生傷害的有害特性;以及保管中因自然分解而引發意想不到的事故的危險性。當然，有些試劑同時具有多種危險特性。因此，在使用時必須注意安全，從開封，保管，直到廢棄，希望實施責任制管理。要認識到所有的試劑都具有“不被人知的危險有害性”，防止化學事故發生。●購買后，請務必確認標簽上的注意事項。●做好預防顛倒，摔壞的措施和管理體制。●在使用前再次...
2015
9-24

未使用完的96孔板試劑盒該作何處理
ELISA試劑盒包裝規格的大小取決于試劑盒里面酶標板的規格大小，常見的有96T(12孔乘以8條)跟48T（12孔乘以4條）兩種。所以當您在選擇ELISA試劑盒的時候考慮自己樣本的收集量再做選擇，以免造成浪費。也許您會想剩余沒用完的板可以再保存等下次實驗重新使用。我司技術卻不贊同該做法，不僅僅是因為回收的板子對后面實驗會造成比較大的誤差。所以選購ELISA是應該考慮另外兩個問題：一、經濟：一塊96孔板，進口的也貴不到哪去，國產的更便宜，你重復利用，這么一折騰，時間，精力以及洗板...

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